Основные этапы работы состояли в исследовании:
Научные материалы / Аденилатциклазный сигнальный механизм / Основные этапы работы состояли в исследовании:
Страница 3

Следует отметить, что проявление АЦ стимулирующего влияния инсулина и инсулиноподобных пептидов во времени имеет сходство в опытах in vitro и in vivo. АЦ активирующий эффект пептидов отчетливо выявляется при коротких сроках влияния пептида (2,5 и 5 мин) при физиологических концентрациях (10-9-10-8М), с увеличением времени действия эффект пептидов ослабевает или отсутствует.

АЦ активирующий эффект инсулина, ИФР-1 и ИПП при разных концентрациях в условиях in vitro

Установив оптимальное время действия пептидов инсулинового суперсемейства, при котором происходит активация АЦС (2.5 мин), необходимо было выявить при каких концентрациях АЦ стимулирующий эффект пептидов наиболее выражен. В разных тканях стимулирующий эффект пептидов инсулиновой природы осуществляется через специфичные рецепторы, отличающиеся по сродству к пептиду в гомологичных и негомологичных пептиду тканях.

Проведено исследование влияния инсулина, ИФР-1, ИПП моллюска и ЭФР в течение 2.5 мин при разных концентрациях (10-12-10-6М) в мембранных фракциях крыс, кур, моллюсков, а также во фракции, выделенной из культуры клеток куриных миобластов.

В мембранной фракции скелетных мышц крыс стимулирующий АЦ эффект инсулина, ИФР-1, ИПП обнаруживается при концентрациях - 10-11-10-7М (Рис. 8). Наиболее выраженный АЦ стимулирующий эффект составляет: для инсулина +250% при 10-8М; для ИФР-1 +91% при 10-9М; для ИПП +111% при 10-8М; для ЭФР +190% при 10-10М. (Рис. 8).

Можно отметить, что в диапазоне концентраций 10-10-10-7М наиболее четко выражен активирующий АЦ эффект инсулина, эффекты других исследованных пептидов инсулиновой природы проявлялись слабее. АЦ стимулирующий эффект ЭФР проявлялся при более низких концентрациях (10-11-10-10М).

Рис. 8. Базальная активность АЦ принята за 100%. Время действия пептидов 2.5 мин

Таблица 3.

Влияние in vitro разных концентраций инсулина на активность АЦ во фракциях мышечных мембран куриных эмбрионов разного возраста и цыплят

Объекты (возраст)

10-сут

Эмбрионы

13-сут

Эмбрионы

16-сут

Эмбрионы

Цыплята

3-сут

Воздействия

Активность АЦ (пмоль цАМФ/мин/мг белка)

В скобках – Активность АЦ (в%) в присутствии инсулина, по отношению к базальной активности, принятой за 100%.

Без

Инсулина

14.02±1.10

(100%)

3.90±0.45

(100%)

2.01±0.09

(100%)

8.52±0.41

(100%)

+инсулин

10-11 М

16.34±1.35

(117%)

4.21±0.34

(108%)

4.81±0.46

(239%)

10.11±0.55

(119%)

+ инсулин

10-10 М

39.14±1.93

(279%)

10.33±0.89

(265%)

5.28±0.30

(263%)

11.24±0.48

(132%)

+ инсулин

10-9 М

48.25±2.21

(344%)

15.92±1.24

(408%)

10.24±0.62

(509%)

14.54±0.82

(171%)

+ инсулин

10-8 М

19.87±1.44

(142%)

9.84±0.56

(252%)

9.92±0.47

(494%)

19.55±1.13

(238%)

+ инсулин

10-7 М

17.13±0.98

(122%)

4.93±0.45

(126%)

7.51±0.33

(374%)

22.21±1.37

(261%)

+ инсулин

10-6 М

17.90±1.12

(128%)

5.12±0.21

(131%)

1.95±0.22

(97%)

24.39±1.62

(286%)

Страницы: 1 2 3 4 5 6 7 8