На чашку Петри наносят подряд 3 большие капли сыворотки анти-резус одной серии и параллельно — 3 капли сыворотки дру­гой серии, получая два горизонтальных ряда сывороток. Затем в 1-Й вертикальный ряд сывороток обеих серий вносят по неболь­шой капле исследуемой крови (соотношение сыворотки и крови 1.0 : 1 или 5 : 1), в средний ряд — по такой же капле стандартных резус-положительных эритроцитов (контроль активности) и в 3-й ряд — резус-отрицательные стандартные эритроциты (контроль специфичности). Отдельной для каждой капли стеклянной палоч­кой или углом предметного стекла тщательно перемешивают сыворотку и эритроциты, чашки закрывают крышкой и помещают на водяную баню при температуре 46—48°С. Спустя 10 мин учи­тывают результат, просматривая чашку в проходящем свете. В капле со стандартными резус-положительными эритроцитами должна быть агглютинация, в капле с резус-отрицательными эритроцитами она должна отсутствовать. Если в каплях обеих серий сывороток с исследуемыми эритроцитами определяется агглютинация, кровь резус положительная, если она отсутству­ет,— кровь резус-отрицательная.

Следует помнить о том, что добавлять изотонический раствор хлорида натрия в каплю сыворотки, как это принято при опреде­лении групповой принадлежности крови по системе АВО, катего­рически запрещено, так как это может нарушить реакцию агглютинации.

Ошибки при определении резус-фактора обусловлены или снижением активности стандартных сывороток анти-резус, или нарушением пропорции сыворотка — кровь, несоблюдением темпе­ратурного режима при исследовании, уменьшением времени экспозиции (менее 10 мин), добавлением изотонического раст­вора хлорида натрия, отсутствием контрольных проб на актив­ность и специфичность сыворотки, групповыми несоответствиями стандартных сывороток и исследуемых и стандартных эритро­цитов.

Для экспресс-метода определения резус-фактора исполь­зуют специальный реагент - сыворотку анти-резус 4(АВ) груп­пы, разведенную 20—30% раствором альбумина человека или 30— 33% раствора полиглюкина, используемую как вещество, способ­ствующее агрегации эритроцитов при комнатной температуре.

Каплю стандартной сыворотки анти-резус 4(АВ) группы на­носят на предметное стекло или чашку Петри и параллельно нано­сят каплю резус-отрицательной сыворотки 4(АВ) группы, не содержащей антител. К ним добавляют в 2—3 раза меньшего объема каплю исследуемой крови, перемешивают углом предмет­ного стекла, стеклянной палочкой или путем покачивания в течение 3—4 мин, после чего добавляют по 1 капле изотонического раствора хлорида натрия и по истечении 5 мин учитывают реакцию. При наличии агглютинации эритроцитов с сывороткой анти-резус и отсутствии с контрольной сывороткой кровь резус-положительная, при отсутствии агглютинации с обеими сыворотка­ми кровь резус-отрицательная. В случаях появления агглютина­ции с обеими сыворотками реакцию следует рассматривать как сомнительную и для экстренного переливания следует использо­вать только резус-отрицательную кровь, а при ее отсутствии в опас­ной для жизни больного ситуации возможно переливание резус-положительной крови после проведения пробы на совместимость по резус-фактору.